納米酶是一類(lèi)自身蘊(yùn)含酶學(xué)特性的納米材料，它同天然酶一樣，能夠在溫和條件下催化酶的底物，呈現(xiàn)出與天然酶相同的酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)和反應(yīng)機(jī)制，并且可以作為天然酶的替代物用于檢測(cè)疾病。近年來(lái)，學(xué)界發(fā)現(xiàn)納米酶蘊(yùn)含的氧化還原酶活性可以調(diào)節(jié)細(xì)胞中活性氧，如催化腫瘤部位的H2O2產(chǎn)生羥基自由基，從而引起腫瘤細(xì)胞的凋亡。然而，由于腫瘤部位H2O2濃度有限，且納米酶與底物H2O2的親和力較低，產(chǎn)生的羥基自由基通常不足以有效地治療腫瘤。納米酶的腫瘤治療應(yīng)用目前面臨以下兩個(gè)問(wèn)題：一是如何提升納米酶與底物H2O2的親和力；二是如何提高腫瘤細(xì)胞中H2O2的濃度。

近期，ACS Nano在線發(fā)表了中國(guó)科學(xué)院院士、中科院生物物理研究所/中科院納米酶工程實(shí)驗(yàn)室研究員閻錫蘊(yùn)團(tuán)隊(duì)的最新研究進(jìn)展。研究人員針對(duì)上述問(wèn)題，設(shè)計(jì)出一種新型納米酶——硫鐵礦（FeS₂）納米酶。研究人員發(fā)現(xiàn)，這種納米酶結(jié)合H₂O₂底物的親和力極高，催化H₂O₂的效率（kcat/KM）比傳統(tǒng)Fe₃O₄納米酶高4144倍；比天然辣根過(guò)氧化物酶高3086倍。研究人員使用第一性原理計(jì)算方法探究其原因，發(fā)現(xiàn)與傳統(tǒng)的Fe₃O₄納米酶相比，硫鐵礦（FeS₂）納米酶與底物H₂O₂相互作用時(shí)配位結(jié)合的共價(jià)鍵更短，而且表面含有很多溝壑狀結(jié)構(gòu)，使其與底物的結(jié)合能力更強(qiáng)，因此能夠催化腫瘤部位有限的H₂O₂，產(chǎn)生大量的羥基自由基，引起腫瘤細(xì)胞的凋亡。

研究發(fā)現(xiàn)，硫鐵礦納米酶不僅對(duì)H₂O₂具有很高的親和力, 而且還能夠自身產(chǎn)生H₂O₂。這是由于硫鐵礦納米酶具有谷胱甘肽氧化酶的活性，可以氧化細(xì)胞中的還原型谷胱甘肽（GSH）生成H₂O₂，生成的H₂O₂又可作為過(guò)氧化物酶的底物。因此，硫鐵礦納米酶蘊(yùn)含的兩種類(lèi)酶效應(yīng)——谷胱甘肽氧化酶和過(guò)氧化物酶，構(gòu)成自級(jí)聯(lián)反應(yīng)，能夠持續(xù)產(chǎn)生羥基自由基，引起更多腫瘤細(xì)胞的凋亡。此外，谷胱甘肽氧化酶活性還會(huì)引起GSH的消耗，而GSH是膜脂修復(fù)酶——谷胱甘肽過(guò)氧化物酶4的輔因子，它的耗竭會(huì)導(dǎo)致后者的失活，使細(xì)胞中的脂質(zhì)過(guò)氧化物不能被有效清除，引起細(xì)胞的鐵死亡。

硫鐵礦納米酶同時(shí)引起腫瘤細(xì)胞凋亡和鐵死亡的特性，使其在含有KRAS突變、凋亡抗性的耐藥腫瘤細(xì)胞中仍表現(xiàn)出高效的腫瘤治療效果。此外，研究人員還研究了硫鐵礦納米酶的生物安全性，結(jié)果表明，它的細(xì)胞殺傷效果具有腫瘤特異性，這主要是由于腫瘤細(xì)胞比正常細(xì)胞代謝更旺盛，產(chǎn)生更多的H₂O₂，使納米酶催化產(chǎn)生更多的羥基自由基；腫瘤細(xì)胞需要更多GSH以維持氧化還原平衡，因此，對(duì)GSH耗竭更敏感；腫瘤細(xì)胞的快速生長(zhǎng)需要更多的鐵離子，因此，更易發(fā)生鐵死亡。硫鐵礦納米酶具有良好的生物降解性，腫瘤特異性殺傷效果和生物降解性為它的體內(nèi)應(yīng)用提供了安全性保障。

高活性的硫鐵礦納米酶克服了傳統(tǒng)過(guò)氧化物納米酶對(duì)H₂O₂親和力低的問(wèn)題，能夠催化腫瘤部位有限的H₂O₂產(chǎn)生大量的羥基自由基。硫鐵礦納米酶的新活性——谷胱甘肽氧化酶活性的發(fā)現(xiàn)，不僅能為其過(guò)氧化物酶活性的發(fā)揮提供底物H₂O₂，而且能夠催化氧化谷胱甘肽，引起細(xì)胞鐵死亡，從而實(shí)現(xiàn)腫瘤的凋亡-鐵死亡協(xié)同治療。重要的是，硫鐵礦納米酶無(wú)須其他幫助，單一材料即可實(shí)現(xiàn)高效、安全的腫瘤治療效果，這表明它具有臨床轉(zhuǎn)化潛力。

該工作由生物物理所、揚(yáng)州大學(xué)和深圳市第二人民醫(yī)院合作完成。閻錫蘊(yùn)，深圳市第二人民醫(yī)院教授聶國(guó)輝，生物物理所研究員高利增和范克龍為論文的通訊作者；生物物理所博士生孟祥芹和揚(yáng)州大學(xué)博士李丹丹為論文的共同第一作者。研究工作得到國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃、國(guó)家自然科學(xué)基金、中科院創(chuàng)新交叉團(tuán)隊(duì)和中科院青年創(chuàng)新促進(jìn)會(huì)等的資助。

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高效-自級(jí)聯(lián)的硫鐵礦納米酶用于腫瘤的凋亡-鐵死亡協(xié)同治療